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多肽常见问题解答
1. 如那里置和生涯多肽？
冻干粉形式的多肽 ，经密封包装可在常温条件下稳固运输 ，消融状态的多肽不宜恒久生涯。
多肽生涯指南：需要恒久生涯的多肽 ，应以冻干粉形式存放在含有干燥剂的密封容器内 ，置于-20°C生涯 ，-80°C效果更好 ，可以最大限度地阻止多肽降解。这种贮存方法可以使多肽可生涯数年 ，阻止了被细菌降解和氧化 ，也可以阻止二级结构的形成。
翻开包装： 在翻开包装和称重前 ，请先将多肽在干燥器中平衡至室温。因多肽往往具有吸湿性 ，未经平衡到室温的多肽在翻开盖子后易凝聚 ，从而降低了多肽产品的稳固性。
称重： 迅速称取您所需的多肽 ，并将剩余多肽继续贮保存-20°C或更低温度。与其他多肽相比 ，含有半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺和谷氨酸N -最后的多肽生涯期更短。
2. 怎样消融多肽？
多肽的消融性很洪流平上取决于多肽的极性。酸性的卵白消融于碱性溶液 ，而碱性卵白可消融于酸性溶液 ，含有大宗不带电荷的极性氨基酸残基或疏水性氨基酸的疏水性多肽和中性多肽可先消融于少量有机溶剂中 ，如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或异丙醇 ，然后加水（蒸馏水）稀释。含有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽不可用DMSO消融 ，由于DMSO可能造成侧链氧化。
多肽消融测试： 在多肽消融之前先取小部分举行多肽消融测试 ，您需要测试几种差别的溶剂 ，直到找到最适当的一种。超声处置惩罚有助于打碎颗粒并增添消融度。（注重: 超声处置惩罚会引起溶液发热和多肽降解。）
将每个酸性氨基酸赋值为－1 ，包括天冬氨酸（D）、谷氨酸（E）、以及羧基最后-COOH。每个碱性氨基酸赋值为＋1 ，包括精氨酸（R）、赖氨酸（K）、组氨酸（H）以及氨基最后-NH2。然后盘算整个多肽的电荷数。
若是整段肽所带电荷是阳性的 ，说明该肽是碱性的�？上仁笛橛谜袅笏聪�；若是不溶于水 ，接着实验用少量10%-25%醋酸消融 ，若是仍然失败的话 ，添加一些TFA（10-50微升）来增溶 ，然后用水稀释至理想浓度。
若是整段肽所带电荷是阴性的 ，说明该肽是酸性的。酸性的多肽可以实验用PBS（PH 7.4）来消融 ，若是不溶的话 ，添加少量的碱性溶剂 ，如0.1 M的碳酸氢铵 ，然后加水稀释至理想浓度。含有游离半胱氨酸的多肽应溶于脱气的酸性缓冲液中 ，由于当PH值大于7时 ，巯基会被迅速氧化成二硫化物。
若是整段肽电荷是零 ，说明肽是中性的。中性肽通常溶于有机溶剂。首先 ，实验添加少量乙腈、甲醇或异丙醇。关于高度疏水的多肽 ，可使用少量的二甲基亚砜消融 ，然后用水稀释至理想浓度。关于含有自由半胱氨酸的肽 ，需使用DMF而不是DMSO。关于有群集倾向的肽 ，可添加6M盐酸胍或8M尿素 ，然后举行须要的稀释。
为了避免或只管镌汰多肽降解 ，请将多肽以冻干粉形式生涯在-20°C ，-80°C更佳。若是需要生涯溶液肽 ，最好分成小样存放 ，以阻止重复冻融。一份样品融冻后未用完 ，应扔掉。细菌降解有时会成为溶液肽的贫困 ，以是请将肽溶于无菌水或肽溶液过滤除菌。
碱性氨基酸: K, R, H, N-terminus
酸性氨基酸: D, E, C-terminus
极性中性氨基酸: F, I, L, M, V, W, Y
非极性疏水氨基酸: G, A, S, T, C, N, Q, P, 乙�；� ，酰胺基
举例说明：
RKDEFILGASRHD: (+5) + (-4) = +1 以为是碱性多肽 ，见办法2
EKDEFILGASEHR: (+4) + (-5) = -1 以为是酸性多肽 ，见办法3
AKDEFILGASEHR: (+4) + (-4) = 0 以为是中性多肽 ，见办法4
3.一个肽段是否可溶能展望吗？
我们无法通过研究多肽的结构来展望其在水中的消融度。然而 ，赖氨酸的ε-氨基和精氨酸的胍通常有助于展望消融度 ，尤其是短肽。与此相反 ，含有天门冬氨酸和谷氨酸的酸性肽往往是不易溶于水的 ，但易溶于稀氨水或碱性缓冲液。
4. 怎样选择适合自己研究的多肽纯度？
粗品肽不推荐用于生物实验。粗肽可能含有大宗的非肽类杂质 ，如残留的有机溶剂、扫除剂、TFA和其他不完整肽。TFA不可被完全消除 ，通常交付的肽以TFA盐的形式保存。若是残留的TFA影响您的实验 ，我们推荐其他盐形式 ，如醋酸盐和盐酸盐等。这些盐通常比通例TFA盐贵20-30%以上。这是由于在转化历程中泛起更多的肽损失和需要更多的原质料。
建议对种种项目接纳以下级别的肽纯度：
>70% 肽纯度
肽微阵列
作为制备抗体的抗原
层析法
酶联免疫吸附试验检测抗血清滴度
>80% 肽纯度
免疫印迹法（非定量）
酶底物肽（非定量）
关闭肽（非定量）
亲和纯化
磷酸化检测
卵白电泳的应用和免疫细胞化学
>95% 肽纯度
标准酶联免疫吸附试验和RIA（定量）
受体配体相互作用（定量）
体内、体外
生物学测定
酶的研究和阻断实验（定量）
NMR研究
质谱剖析
其他定量检测
>98% 肽纯度
SAR研究
临床试验
APIs(药物活性因素)
工业品
X-ray晶体研究
其他敏感的实验：酶与底物、受体与配体相互作用、阻断和竞争实验
5. 什么是多肽的纯度？
多肽的纯度是指HPLC要领在214nm处检测到的目的多肽的含量(214nm是肽链的吸收波长) ，紫外分光光度计检测不到水和残留的盐不�？煞⒚髌渌脑又拾ǎ喝笔蛄校ㄈ笔Я艘桓龌蚨喔霭被岵谢陌行蛄校� ，截断序列（加帽历程中爆发的序列）脱�；げ煌耆蛄校ū⒂谡龊铣衫袒蜃詈蟮牧呀饫蹋�。
多肽纯化不涉及水和盐。HPLC纯化会爆发少量的TFA ，如：游离的氨基最后和其他侧链如Arg、Lys、His都可天生少量TFA杂质。通常交付的多肽多含有微量TFA和残留水。纵然处于冻干状态 ，水也会因共价连系的能力差别而差别水平地保存着。
纯化前的多肽中包括的杂质包括多肽和非多肽物质, 纯化后的多肽中包括的杂质除了TFA盐 ，大大都为序列被修改的多肽。
缺失了一个或多个氨基酸残基的靶序列
为阻止缺失序列的爆发而举行的加帽操作 ，截断序列即爆发于加帽历程中
爆发于整个合成历程或最后的裂解历程
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6. 什么是肽净含量？
肽净含量差别于多肽纯度。肽净含量是指与非肽物质（主要为抗衡离子和水）相比的多肽量�？赏ü被崞饰隼慈范木缓�。通常 ，亲水性多肽纵然在严酷的冻干状态下 ，也会吸收微量的水。因纯化和冻干工艺 ，会导致差别批次的肽净含量有所差别。
7. 怎样合成多肽？
差别于自然卵白质的合成 ，人工合成的偏向是从C到N端。泽溪源的多肽合成是基于PeptideSyn手艺平台的Fmoc或t-Boc法的多肽合成。详细合成由下列几个循环组成：①去�；ぃ篎moc�；さ闹雍偷ヌ灞匦栌胮iperidine去除氨基的�；せ�。②激活和交联：下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化�；罨牡ヌ逵胗卫氲陌被从涣� ，形成肽键。③循环：这两步反应重复循环直到合成完成。接着合成的肽从树脂切割和去�；�。最后被沉淀、洗脱、冷冻干燥。
8. 怎样对合成的多肽举行质检？
公司对客户提供的所有质料均严酷保密。泽溪源总是在发送产品时 ，同时免费提供HPLC和MS检测效果。公司所有多肽均接纳反相色谱法纯化。以质谱法测定肽的分子量来确定产品是否准确 ，MS检测效果还可显示大部份的主要杂质。若是须要 ，还可提供肽净含量检测 ，如氨基酸剖析或元素剖析。这些要领可以证实多肽的氨基酸组成 ，他们均可作为多肽确认的增补要领。所有交付的肽均抵达了客户要求的纯度。没有抵达纯度要求的那些多肽均被扬弃。虽然若是客户需要 ，也可以发送给他们。
9.公司对合成的多肽提供分装效劳吗？
凭证要求 ，泽溪源可以将您的部分或所有订单 ，免费分装成小份。由于少量分装可以阻止多次重复冻融 ，镌汰容器的开盖和闭合的次数 ，镌汰处置惩罚不当或细菌污染的时机 ，让您的多肽越发稳固。
10.什么是质料药（APIs）、目录肽（catalog peptides）、合成肽（custom peptide synthesis）？
质料药（活性药物因素）是医药中具有药物活性的因素 ，如缩宫素、恩夫韦地等。目录肽是市场上销售的多肽 ，他们通常以较高的纯度水平批量生产。合成肽通常是凭证客户的详细要求定制 ，如特定序列、修饰、差别纯度、差别长度等要求。
11. 能够合成的多肽的最大长度是几多？
我们乐成合成了长度为120个氨基酸的多肽。 50个氨基酸长度的多肽属于通例合成。
